Plasticidad Neuronal
Jefe de Laboratorio: Dr. Alejandro F. Schinder
Metodología que se utiliza
Estudiamos la neurogénesis en el hipocampo de ratón adulto. Utilizamos construcciones retrovirales para expresar diversos transgenes in vivo (incluyendo reporteros fluorescentes) para identificar y manipular neuronas nuevas generadas en el giro dentado adulto. Como la transducción retroviral ocurre exclusivamente en células en división, los retrovirus son herramientas confiables para visualizar la progenie de células progenitoras y distinguir fácilmente las neuronas nuevas del resto de la población. Además, hemos expresado otros transgenes para modificar vías de señalización así como para utilizar fotoestimulación (con channelrhodopsin-2) para interrogar la función de nuevas neuronas. De esta manera, podemos modificar la expresión génica en neuronas que se desarrollan e integran in vivo en ratones que experimentan diversas condiciones comportamentales o de diferentes background genético.
Para estudiar las propiedades funcionales y la conectividad neuronal utilizamos registros electrofisiológicos e imágenes en tiempo real en rebanadas agudas, donde de identifica las neuronas nuevas a través del reportero fluorescente. Mediante registros electrofisiológicos de patch clamp monitoreamos las conexiones, plasticidad sináptica y excitabilidad. La anatomía se estudia combinando inmunofluorescencia y microscopía confocal para determinar la expresión de marcadores, morfología, espinas dendríticas. Estos enfoques resultan en mediciones cuantitativas de una gran variedad de parámetros morfológicos y funcionales.