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Genética y Bioquímica de Rhizobacterias

Jefe de Laboratorio: Dra. Angeles Zorreguieta

Integrantes del laboratorio

Dra. Daniela M. Russo, Investigadora Asistente del CONICET
Dra. Patricia Abdián, Investigadora Asistente del CONICET
Dr. Rodrigo Sieira, Investigador Asistente de CONICET
Dra. Diana M. Posadas. Becaria posdoctoral del CONICET
Dr. Walter Draghi. Becario posdoctoral del FONCYT
Lic. Alfonso Soler Bistué, Tesista de Doctorado, FCEyN, UBA; becario doctoral de CONICET
Lic. Nicolás Vozza, Tesista de Doctorado, FCEyN, UBA, becario doctoral del CONICET
Lic. Verónica Ruiz, Tesista de Doctorado, FCEyN, UBA, becario doctoral del CONICET
Srta. Carol Davies Sala, estudiante de Biología, becaria UBA
Lic. Gastón Arocena, becario doctoral del CONICET

Objetivo general del laboratorio

Estudiamos distintos aspectos de la fisiología de proteobacterias que contribuyen a la colonización y su supervivencia en los diversos nichos que habitan.  Nos interesa determinar las bases moleculares de la adhesión entre bacterias durante la formación de biofilms, así como la adhesión de la bacteria al  hospedador en bacterias del grupo Rhizobiaceae (Rhizobium y Brucella).  En un proyecto en colaboración, tenemos como objetivo explorar la posibilidad de inactivación de genes de resistencia a antimicrobianos u otros esenciales bacterianos a través de técnicas de silenciamiento.

Pregunta que se intenta responder

Nos proponemos:

  • Dilucidar el rol que los factores extracelulares producidos por Rhizobium tienen en el ensamblado de una matriz extracelular durante la formación de biofilms
  • Determinar el rol que las proteínas de las familias de autotransportadores tienen en la colonización de la célula hospedadora por Brucella spp.
  • Definir si el silenciamiento de diferentes genes bacterianos por técnicas antisentido es una estrategia viable para el tratamiento de infecciones bacterianas

Metodología que se utiliza

Para determinar los factores que intervienen en las propiedades de adhesión de Rhizobium y Brucella utilizamos un enfoque mutacional y análisis de los fenotipos asociados tanto in vitro como  in vivo (durante la interacción con la célula hospedadora).  Dada la redundancia funcional que pueden presentar algunas adhesinas recurrimos también al estudio del efecto de la sobre-expresión de los genes blanco tanto en la bacteria original como en sistemas heterólogos. La localización de las adhesinas de naturaleza proteica se realiza por inmunofluorescencia y microscopía confocal.

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Publicaciones

Sorroche, F.G., Rinaudi, L.V.,, Zorreguieta, A , Giordano, W. EPS II-Dependent autoaggregation of Sinorhizobium meliloti planktonic cells. Curr Microbiol. (en prensa).     PubMed

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Subsidios

“Determinantes moleculares de la supervivencia y la colonización del hospedador por Brucella spp.”. X-240, UBACyT.  Universidad de Buenos Aires.

“Unidad funcional de bioseguridad para el manejo de microorganismos patógenos” PME-2007. FONCYT. Agencia de promoción Científica y Tecnológica

“Bacterias cultivables” del proyecto: “Biología del suelo para una agricultura sustentable (BIOSPAS). PID-52 en el marco del Proyecto Áreas Estratégicas PAE-2007. FONCYT. Agencia de Promoción Científica y Tecnológica. Función: Investigador Responsable uno de los nodos (PID-52): A. Zorreguieta. Investigador coordinador científico: Luis Wall

“Biofilms de rizobios: análisis genético de su formación y relevancia en la ecofisiología de la bacteria”, PIP-545  CONICET 2009-2011

Logros

  • Hemos demostrado que Brucella suis posee dos translocasas de la membrana interna del tipo RND (Resistance Nodulation Division)/MFP que serían funcionales en B. suis. El homólogo a TolC (BepC) reclutaría a estas translocasas de la membrana interna formando un canal transitorio de eflujo de compuestos tóxicos que serían importante para la supervivencia de la bacteria.
  • Mostramos que Rhizobium leguminosarum formaría una estructura típica de biofilm en un proceso mediado por el EPS, el LPS y proteínas secretadas por el sistema PrsDE.
  • Recientemente, en colaboración con el Dr. M. E. Tolmasky presentamos evidencias que indican que es posible silenciar el gen de resistencia a amikacina mediante tecnología EGS.