Genética Bacteriana
Jefe de Laboratorio: Dr. Luis Ielpi
Metodología que se utiliza
Las preguntas que se hace nuestro laboratorio requieren conocimiento bioquímico de la estructura de las proteínas que forman parte de la construcción y transporte de los intermediarios del polisacárido. Dichos intermediarios se forman en el interior celular mediante glicosiltransferasas específicas, que transfieren en forma ordenada y secuencial azúcares a un componente aceptor de la membrana interna, formando un bloque base de unos pocos azúcares. La unión de un número de bloques base por un sistema de polimerización, generalmente asociado con el transporte hacia el exterior celular, forman un polisacárido. Así el polisacárido-O, la porción externa del lipopolisacárido, posee unas pocas decenas de bloques, en cambio los polisacáridos capsulares poseen hasta un centenar de bloques, y los polisacáridos liberados al medio mas de un millar de bloques.
Entre los estudios que realizamos podemos nombrar a:
- Sobreexpresión y purificación de proteínas de membrana.
- Caracterización de la actividad bioquímica de las enzimas que participan en la formación de los intermediarios de síntesis del polisacárido.
- Caracterización bioquímica de la enzima que participa en la unión de los intermediarios de síntesis, para formar una cadena que va creciendo desde el interior celular hacia el espacio extracelular.
- Caracterización bioquímica de las proteínas que participan en el transporte de las cadenas en crecimiento a través de la pared celular.
- Mutaciones y deleciones de proteínas de interés.
- Estudios de la estructura de las proteínas mencionadas mediante cristalografía de Rayos X y próximamente mediante RMN.
- Estudio de la interacción de las proteínas mencionadas con las membranas de la célula.
- Estudios de interacción proteína-proteína in vitro e in vivo.
- Construcción de mutantes bacterianas para analizar el comportamiento de proteínas variantes construidas en le laboratorio.