Biología Molecular Vegetal

Objetivo general del laboratorio

Recientemente hemos encontrado que la proteína Bell-like homeodomain 1 (BLH1) participa en la vía  de señalamiento del phyA en su modo de acción HIR. Las plantas mutantes blh1 de Arabidopsis thaliana tienen disminuidas sus respuestas a la luz roja lejana continua pero presentan respuestas normales al modo de acción VLFR.

El objetivo de nuestro laboratorio es el de caracterizar  factores de transcripción que participan en la respuesta HIR al final de la cadena de señalamiento del phyA.

Pregunta que se intenta responder

Nos interesa conocer de qué forma la proteína BLH1 participa en la cadena de transducción del fitocromo A. En un principio nuestra estrategia es la determinar la regulación de la expresión de la proteína BLH1 y determinar que otras proteínas participan en la transducción de la señal del fitocromo A.

Metodología que se utiliza

Estudio de la expresión de diferentes genes de plantas por la técnica de PCR en Tiempo Real. Fusión de promotores a la región codificante de gusA. Medida de GUS como una medida de la expresión de genes. Ensayos histoquímicos de GUS para estudiar la expresión  diferencial de genes en la  planta. Ensayos de un hibrido en levaduras para caracterizar interacción entre diferentes proteínas o de una proteína por un secuencia de oligonucleotidos. Obtención de plantas transgénicas de Arabidopsis thaliana por el procedimiento de inmersión de las inflorescencias de la planta en el cultivo de Agrobacterium tumefaciens. Caracterización de mutantes homocigotas obtenidas  por inserción de T-DNA por PCR. Medida del la inhibicion del alargamiento de los hipocotilos, ángulo de cotiledones y ángulo de los hipocotilos en plantas tratadas en forma diferencial.

Publicaciones

Staneloni, R.J., Rodríguez-Batiller, M.J., Legisa, D., Scarpin, M.R., Agalou, A., Cerdán, P.D., Meijer, A.H., Ouwerkerk, P.B., Casal, J.J. Bell-like homeodomain selectively regulates the high-irradiance response of phytochrome A. Proc Natl Acad Sci U S A. 106: 13624-13629 (2009).     PubMed

Staneloni, R.J., Rodríguez-Batiller, M.J., Casal J.J. Abscisic acid, high-light, and oxidative stress down-regulate a photosynthetic gene via a promoter motif not involved in phytochrome-mediated transcriptional regulation. Mol Plant.1: 75-83 (2008).     PubMed

Subsidios

Bell-like homeodomain 1 (BLH1) participa en el modo de acción HIR del fitocromo A
Código: PIP 6082
Fecha  2006/2008
Entidad Otorgante  CONICET
Monto $9.000

Logros

Hemos estudiado la expresión del gen CAB3 (Lhcb1*2) por diferentes modos de acción de los fitocromos. Se encontró que había una secuencia de 42 pb en el promotor del gen Lhcb1*2  especifica para el modo de acción  HIR del fitocromo A pero no necesaria para otras forma de activación de los fitocromos. En ensayos de un hibrido en levaduras se encontró que la secuencia HIR  interaccionaba con el factor de transcripcion Bell-like homeodomain1 (BLH1). Las plantas mutantes de blh1 tienen  reducida la respuesta al modo de acción HIR pero presentan respuestas normales a otros estímulos de luz.