Biología Celular del RNA
Jefe de Laboratorio: Dra. Graciela L. Boccaccio
Metodología que se utiliza
Los interrogantes que abordamos en nuestro laboratorio requieren una combinación de estrategias de bioquímica, biología celular y molecular, y el uso intensivo de microscopía avanzada, incluyendo microscopía confocal en tiempo real.
En nuestro laboratorio encontramos que la formación de SGs está conservada desde mamíferos a insectos, por lo que empleamos células de vertebrados y de mosca en cultivo para estudiar aspectos puntuales. En estos sistemas experimentales es posible manipular selectivamente la expresión de distintos genes para indagar su función aplicando una estrategia avanzada, conocida como ARN de interferencia (ARNi). Esta consiste en anular la expresión de un gen dado presentándoselo a la célula como si fuera un gen foráneo de origen viral. Realizamos “screens por ARNi” en Drosophila, en el cual “apagamos” uno por uno los genes, para identificar cuales están involucrados en el silenciamiento global de ARN mensajeros durante la respuesta de estrés, y en el ensamblado de los SGs y PBs que sirven como reservorios. Una vez identificados las redes de genes candidatas, realizamos estudios farmacológicos y moleculares para ahondar en el mecanismo. Realizan estos estudios MG Thomas, M Loschi, V Slomiansky y MS Vazquez.
También nos interesa entender como se regula la agregación de estructuras relacionadas a SGs y PBs específicas de neuronas, denominadas colectivamente “gránulos de ARN neuronales”. Empleamos cultivos primarios de neuronas de roedor y estudiamos la plasticidad de gránulos de ARN frente a distintos estímulos sinápticos. También aplicamos la estrategia de ARNi contra componentes específicos de estos gránulos neuronales e investigamos su importancia en la sinaptogénesis y plasticidad sináptica. MG Thomas, L Luchelli, D Maschi y M Pascual están a cargo de estos estudios.