Amilodiosis y Neurodegeneración
Jefe de Laboratorio: Dr. Eduardo Castaño
Preguntas y Metodologías
Estudiar los mecanismos por los cuáles se acumula péptido amiloide β (Aβ) en el cerebro.. El péptido Aβ se asocia con la enfermedad de Alzheimer (EA) esporádica y hereditaria, en las que su acumulación provocaría disfunción neuronal en regiones específicas del cerebro. Nuestro interés es estudiar aspectos básicos del metabolismo celular de Aβ, en particular aquellos que resultan en su degradación proteolítica por las metalopeptidasas IDE y NEP. Mediante el uso de cultivos neuronales y astrocitarios exploramos a) cuáles son los sitios ó compartimientos subcelulares de encuentro entre proteasas y sustrato, b) qué factores modulan la actividad proteolítica sobre Aβ y c) cómo se regula la expresión génica de IDE y NEP.
Caracterizar el efecto de péptidos amiloides y estrés oxidativo sobre la dinámica del citoesqueleto en oligodendrocitos (OLG). La vulnerabilidad neuronal en EA está asociada inversamente al grado de mielinización de los axones de las neuronas afectadas. Las regiones más alteradas en el comienzo del proceso patológico son las que continúan su mielinización hasta la vida adulta. Estudiamos cómo el estrés oxidativo y exposición a Aβ en condiciones subletales, inducen el acortamiento rápido de las prolongaciones de OLGs primarios, las células encargadas de la mielinización en el SNC. Mediante proteómica, fosfoproteómica, microscopía confocal e inhibición farmacológica y de expresión, estamos caracterizando las quinasas y sus sustratos involucrados en la respuesta de acortamiento de procesos.
Identificar factores genéticos que modulan la vulnerabilidad neuronal al efecto tóxico de péptidos amiloides. Nuestro interés se enfoca en identificar genes protectores sobre la toxicidad neuronal de diversos amiloides cerebrales. Estos incluyen Aβ de EA y los péptidos ABri y ADan asociados a demencias hereditarias cuyo fenotipo comparte aspectos muy similares a EA. Utilizamos líneas transgénicas de Drosophila con inserciones dirigidas y de expresión condicional de Aβ, ABri ó ADan para inducir toxicidad en grupos neuronales específicos que pueden ser evaluados por tests de comportamiento. Estas líneas son utilizadas para realizar “screenings” de colecciones con deleciones cromosómicas y posteriormente identificar los genes responsables de fenotipos de mayor vulnerabilidad neuronal.